Сулемовая и тимоловая проба

Основные функциональные пробы печени проводят для того, чтобы выяснить состояние печёночной паренхимы. Это биохимические исследования, основанные на определении и в моче, и в крови различных веществ.

Исследование пигментного обмена.

В 1918 г. Гиманс ван ден Берг предложил качественное определение билирубина в сыворотке крови. На содержание билирубина в сыворотке крови влияют: 1) интенсивность гемолиза, поскольку билирубин является продуктом биотрансформации гемоглобина, 2) состояние билирубинвыделительной функции печени, фактически — желчеобразовательная функция гепатоцитов, 3) состояние оттока желчи по желчным путям, или желчевыделительная функция печени.

При добавлении к сыворотке крови диазореактива Эрлиха билирубин даёт цветную реакцию либо сразу (прямая реакция), либо после добавления спитра (непрямая реакция). По интенсивности окраски раствора проводится не только качественное, но и количественное определение билирубина и его фракций. В прямую реакцию вступает глюкуронидбилирубин, или билирубин, связанный в гепатоците с глюкуроновой кислотой. В непрямую реакцию вступает билирубин не связанный, не прошедший в гепатоците процесс конъюгации.

Уровень общего билирубина у здорового человека в сыворотке крови составляет 8,5 — 20, 5 мкмоль/л; связанного билирубина (в прямой реакции) — 0 — 5,1 мкмоль/л; несвязанного билирурубина (в непрямой реакции) — до 16,6 мкмоль/л. У здорового человека соотношение связанного и несвязанного билирубина составляет в среднем 1:3.

При гемолизе, когда гепатоциты просто не успевают конъюгировать билирубин, в крови, по данным непрямой реакции, повышается содержание несвязанного билирубина.

При механической желтухе, когда нарушается отток желчи от гепатоцитов, в крови, по данным прямой реакции, повышается содержание конъюгированного (связанного в гепатоците с глюкуроновой кислотой) билирубина.

При многих заболеваниях печени, когда нарушаются с связывающая билирубин, и выделительная функции гепатоцита, в крови повышается количество обеих фракций билирубина.

Связанный билирубин выделяется с желчью в кишечник и трансформируется в стеркобилин. Стеркобилин всасывается в кровь и по воротной вене поступает в печень, где и задерживается. При дисфункции печени уробилин не задерживается в печени, а поступает в кровь и выделяется с мочой, называясь уробилином. Следовательно, тонкое функциональное состояние гепатоцитов можно оценивать и по уровню уробилина в моче.

Определение дезинтоксикационной (обезвреживающей) функции печени.Эта функция печени обычно оценивается с помощью пробы Квика на синтез гиппуровой кислоты. При этой пробе больному внутривенно вводится бензойнокислый натрий, из которого в печени синтезируется гиппуровая кислота, а затем определяется её количество в моче. При поражении гепатоцитов синтез гиппуровой кислоты снижается до 20 — 10% от должного.

Оценка состояния углеводного обмена в печени.Состояния углеводного обмена определяют по уровню глюкозы и сиаловых кислот в сыворотке крови. У здорового человека уровень глюкозы в цельной капиллярной крови составляет 3,88 — 5,55 ммоль/л, или в плазме крови — 4,22 — 6,11 ммоль/л.. Уровень сиаловых кислот в сыворотке крови здорового человека составляет 2 — 2, 33 ммоль/л. При поражении гепатоцитов уровень сиаловых кислот заметно возрастает, а при введении в кровь больного раствора глюкозы уровень её возвращается к норме замедлено.

Оценка состояния белкового обмена.Поскольку печень выполняет белоксинтетическую функцию, то о функциональном состоянии гепатоцитов судит по количеству общего белка и его фракций в сыворотке крови. У здорового человека уровень белка в сыворотке крови составляет 70 — 90 г/л. При электрофорезе на ацетат-целлюлёзной плёнке альбумины составляют 56,5 — 66,5%, а глобулины — 33,5 — 43,5%. Фракции глобулинов: α₁-глобулинов — 2,5 — 5%, α₂-глобулинов — 5,1 — 9,2%, β- глобулинов — 8,1 — 12,2%, γ- глобулинов — 12,8 — 19%.

Гипопротеинемия наблюдается при портальном циррозе печени, а гиперпротинемия — при постнекротическом циррозе печени.

Для характеристики состояния белковой функции печени используют т.н. осадочные пробы. Проводят сулемовую и тимоловую пробы.

В основе сулемовой пробы лежит осаждение белков сыворотки крови раствором сулемы. Полученные данные оценивают в мл раствора сулемы, требуемых для помутнения раствора. Нормальные величины пробы составляют: 1,6 — 2,2 мл.

Тимоловая проба основана на помутнении сыворотки крови электрофотометрическим способом. Результаты её оцениваются в единицах светопоглощения и составляют в норме 0 — 5 ед.

Результаты осадочных проб увеличиваются при циррозах печени и гепатитах.

Оценка состояния липидного обмена. Поскольку печень играет важнейшую роль в обмене и синтезе липидов, при её заболеваниях определяют в сыворотке крови уровень общих липидов (в норме — 4-8 г/л), общего холестерина (менее 5,2 ммоль/л), а также уровни фракций холестерина, липопротеидов, триглицеридов, жирных кислот, вычисляют коэффициент атерогенности.

Оценка активности печёночных ферментов.Известно, что гепатоциты содержат ряд органоспецифических ферментов: АлАТ, альдолазу, щелочную фосфатазу, лактатдегидрогеназу.

В норме активность АлАТ, определённый методом Райтмана — Френкеля, составляет 0,1 — 0,68 мкмоль/ч/л. Активность альдолазы в сыворотке крови составляет 6-8 мл. Активность лактатдегидрогеназы в сыворотке крови в норме составляет до 460 МЕ. Увеличение активности этих ферментов возрастает при повреждении или распаде гепатоцита, повышении проницаемости его мембраны.

У здорового мужчины активность щелочной фосфатазы составляет 0,9 — 2,3 мккат/л, ау здоровой женщины — 0,7 — 6,3 мккат/л. Повышение активности фермента наступает при механической желтухе, билиарном циррозе печени.

Определение показателей водно-солевого и минерального обмена. Для оценки нарушений функции гепатоцита обычно определяют уровни натрия, калия, кальция, железа и меди в сыворотке крови. Уровень сывороточного железа при определении методомFereneSсоставляет у женщин — 9 — 29 мкмоль/л, у мужчин — 10 — 30 мкмоль/л. У больных с острыми гепатитами и активными циррозами печени происходит снижение уровня сывороточного железа при росте уровня сывороточной меди.

Сулемовая проба (белковый обмен)

В норме сулемовая проба положительна при использовании 1,5-2,2 мл раствора сулемы. Изменение дисперсности белков выявляются при заболеваниях печени, особенно при хроническом гепатите и циррозе. В этих случаях количество сулемы, необходимое для помутнения сыворотки крови, снижается до 1 мл.

При инфекционных гепатитах сулемовая проба резко положительная, затем ее показатель увеличивается. При желтухе, связанной с нарушением оттока желчи, результат пробы в первые дни соответствует норме, затем он становиться все более положительным по мере вовлечения в патологический процесс печеночной ткани.

Сулемовая проба

Сулемовая проба (реакция Таката — Ара) — это реакция флоккуляции, применяемая при исследовании функции печени. Сулемовая проба основана на способности сывороточного альбумина поддерживать устойчивость коллоидного раствора хлорной ртути и карбоната натрия. При изменении соотношения между белковыми фракциями плазмы крови в сторону глобулинов, которое чаще всего возникает при нарушении функции печени, устойчивость коллоидов нарушается, и из раствора выпадает хлопьевидный осадок.

В норме образования хлопьевидного осадка не происходит. Реакция считается положительной, если осадок наблюдается не менее чем в 3 пробирках.

Сулемовая проба не является строго специфической и бывает положительной как при паренхиматозных поражениях печени, так и при некоторых новообразованиях, ряде инфекционных заболеваний и др.

Диспротеинемические тесты (сулемовая, тимоловая пробы, проба Вельтмана)

Проба Вельтмана 0,4-0,5 мл р-ра Са (V-VII пробирка)

Коллоино-осадочная реакция Вельтмана, основанная на образовании преципитата белков под влиянием хлористого кальция, может изменяться в двух направлениях: в сторону укорочения коагуляционной ленты (полосы) или ее удлинения.

К удлинению полосы приводят усиление разрастания соединительной ткани в органах (фиброз), пролиферация тканей, ускорение деления клеток, разрушение эритроцитов (гемолитические состояния), повреждение паренхимы печени. Удлинение полосы отмечается при вирусном гепатите, циррозе, острой желтой атрофии печени, малярии, после переливания крови, аутогемотерапии и при многих воспалительных заболеваниях (пневмония, плеврит, туберкулез легких). Удлинение коагуляционной ленты может вызываться и повышением содержания гамма-глобулинов, снижающих коллоидную стабильность сыворотки.

Укороченеи обнаруживается при острых воспалительных и экссудативных процессах, при которых увеличивается содержание альфа- и бета-глобулинов и за счет этого повышается стабильость сыворотки крови, а именно: при экссудативной фазе ревматизма, активном туберкулезе легких, нефротическом синдроме, макроглобулинемии Вальденстрема, альфа-2-, бета-плазмоцитомах, злокачественных опухолях, экссудативном перитоните, некрозах (омертвении, разрушении тканей), острых инфекционных заболеваниях. Крайнее укорочение полосы (отрицательная проба) наблюдается у больных острым ревматизмом.

Сулемовая проба 1,6-2,2 мл дихлорида ртути

Сулемовая проба (реакция Таката — Ара) — это реакция флоккуляции, применяемая при исследовании функции печени. Сулемовая проба основана на способности сывороточного альбумина поддерживать устойчивость коллоидного раствора хлорной ртути и карбоната натрия. При изменении соотношения между белковыми фракциями плазмы крови в сторону глобулинов, которое чаще всего возникает при нарушении функции печени, устойчивость коллоидов нарушается, и из раствора выпадает хлопьевидный осадок.

В норме образования хлопьевидного осадка не происходит. Реакция считается положительной, если осадок наблюдается не менее чем в 3 пробирках.

Сулемовая проба не является строго специфической и бывает положительной как при паренхиматозных поражениях печени, так и при некоторых новообразованиях, ряде инфекционных заболеваний и др.

При большинстве печеночных заболеваний, которые сопровождаются снижением способности к синтезу белковых структур, повышены показатели тимоловой пробы. Но существуют и другие причины, которые могут повлиять на результат исследования:

• нефротический синдром с потерей белка;
• системные заболевания;
• уутоиммунная патология;
• болезни соединительной ткани.

Только адекватный всесторонний подход к проблеме позволит адекватно оценить результаты пробы и ситуацию в целом.

Как осуществляется анализ?

Пациент утром натощак приходит в лабораторию, где осуществляют забор венозной крови. Важно, чтобы за 6-8 часов до исследования он не принимал пищу. Исключают прием алкоголя за несколько суток до исследования, использование кофеинсодержащих напитков.

Сыворотка крови обследуемого добавляется к специальному раствору с известной кислотностью (водородный показатель равен 7,8). Объем тимола 5-7 мл. Он растворен в вероналовой буферной системе. Тимол – не кислота, это представитель группы циклических соединений, называемых фенолами. При связывании с глобулинами (их избытком), холестеролом, фосфолипидами в условиях известной кислотности исследуемый раствор мутнеет. Степень помутнения оценивается с помощью колориметрического или нефелометрического метода. Она сравнивается с мутностью раствора сульфата бария, принятая за единицу. Когда оцениваются результаты тимоловой пробы, показатели нормы варьируют от 0 до 5 единиц.

Интерпретация результатов

Результаты пробы в заключении врачей-лаборантов выглядят следующим образом: проба положительная или проба отрицательная. Иногда возможно указание на степень повышения. Выражается в количестве «крестов» или единиц (при норме от 0 до 5).

Тимоловая проба повышена при заболеваниях печени, связанных с воспалительным компонентом. Это вирусные и токсические гепатиты, холестатические поражения органа. Обычно в случае острого повреждения гепатоцитов в силу цитопатического (разрушающего клетки) действия вирусов проба резко положительная. Если имеет место хронический гепатит, результаты тимоловой пробы могут быть в пределах нормы, либо слегка повышены.

Фиброз и цирроз также могут повысить вероятность выявления положительной осадочной пробы. Поражение печени токсическими продуктами, лекарственными средствами также снижает ее белоксинтезирующую функцию за счет некроза клеток. Синтез альбумина уменьшается, в то время как в больших (относительно альбумина) концентрациях появляются глобулиновые фракции.

Другие состояния, вызывающие положительный результат

Причины снижения уровня альбуминов по сравнению с глобулинами заключаются не только в патологии печени. Существует ряд болезней и состояний, способных вызвать такие результаты исследования.

Сначала следует исключить нефротический синдром. Он вызван диабетической, уремической нефропатией, а также различными вариантами гломерулонефритов. Подтверждают догадки анализы мочи и крови с оценкой биохимического профиля.

Следующая группа причин – аутоиммунные болезни и заболевания соединительной ткани. Исключают системную красную волчанку (а также люпус-нефрит), склеродермическое поражение, синдром Шегрена, полимиалгию. Для этого врач назначает анализы на иммунологические маркеры.

Часто положительный результат наблюдается при злокачественных опухолях. Это имеет место при так называемом паранеопластическом синдроме.

Недостатки метода

Преимущества анализа в том, что он очень чувствительный. В то же время проведение тимоловой пробы относительно недорого. Но имеются недостатки.

Они связаны с низкой специфичностью. То есть при положительном результате исследования говорить о какой-то определенной патологии нельзя. Группы причин, вызывающих повышение колориметрических характеристик раствора, перечислены выше. Стоит заметить, перечень довольно внушительный.

Осадочные пробы больше используются для подтверждения факта нарушенной функции печени. Кроме тимоловой, используется сулемовая проба. Ее принцип основан на феномене флокуляции. Реактивом является хлоридная соль ртути – сулема. При избытке глобулинов сыворотки крови в пробирке видны хлопья – осадок. Проба считается положительной. Но говорить о каком-то конкретном заболевании она не может, как и тимоловая.

При исследовании больного для врача важно понимать смысл назначения анализов. При выявлении положительной тимоловой пробы становится понятным, что вероятнее всего имеет место нарушение функции печени. Но в то же время так проявляться могут и другие патологии. Этот повод задуматься и составить адекватный план дальнейшей диагностики.

Особенности биохимического анализа крови

Биохимический анализ требует специальной предварительной подготовки пациента. Приём пищи производится не менеечасов до проведения анализа крови. Это основывается на том, что любой пищевой продукт способен оказывать влияние на показатели крови, изменяя тем самым результат анализа, что в свою очередь, может повлечь за собой неправильный диагноз и лечение. Так же, стоит ограничить приём жидкости. Противопоказан приём алкоголя, сладкого кофе и чая, молока, фруктовых соков.

Во время забора крови пациент находится в положении сидя или лёжа. Кровь для биохимического анализа забирают из локтевой вены. Для этого немного выше локтевого сгиба накладывается специальный жгут, затем вводится игла непосредственно в вену и, производится забор крови (примерно, 5 мл). После чего кровь помещают в стерильную пробирку, на которой обязательно указывают данные пациента, и только после этого её направляют в биохимическую лабораторию.

Общий белок – отображает содержание белка в сыворотке крови. Уровень общего белка может увеличиваться при различных заболеваниях печени. Снижение количества белка наблюдается при недостаточном питании, истощении организма.

• у новорожденных он составляетг/л
• у детей до года –г/л
• от 1 до 4 лет –г/л
• от 5 до 7 лет –г/л
• от 8 до 15 лет –г/л
• у взрослых –г/л

Альбумин – простой белок, растворимый в воде, составляющий около 60% всех белков сыворотки крови. Уровень альбуминов снижается при патологиях печени, ожогах, травмах, заболеваниях почек (нефритический синдром), недостаточном питании, на последних месяцах беременности, при злокачественных опухолях. Количество альбуминов увеличивается при обезвоживании организма, а также после приёма витамина А (ретинола). Нормальное содержание сывороточного альбумина составляетг/л у детей в возрасте до 3 лет, у взрослых –г/л. Альбумины составляют от 56,5 до 66,8 %.

Альфа-1-глобулины. Норма 3,5 — 6,0 %, что составляет 2,1 — 3,5 г/л.

Общий билирубин – жёлто-красный пигмент, который формируется в результате распада гемоглобина. В норме содержится 8,5 — 20,5 мкмоль/л. Содержание общего билирубина встречается при любом виде желтухи.

Глюкоза – является первостепенным источником энергии в организме. Норма составляет 3,38 — 5,55 ммоль/л. Повышенное содержание глюкозы в крови (гипергликемия) указывает на наличие сахарного диабета или же на нарушенную толерантность к глюкозе, хронические заболевания печени, поджелудочной железы и нервной системы. Уровень глюкозы может снижаться при усиленных физических нагрузках, беременности, долгом голодании, некоторых заболеваниях желудочно-кишечного тракта, связанных с нарушенным всасыванием глюкозы.

Общий холестерин – важное органическое соединение, являющееся компонентом липидного обмена. Нормальное содержание холестерина составляет 3,9 — 5,2 ммоль/л. Повышение его уровня может сопровождать следующие заболевания: ожирение, сахарный диабет, атеросклероз, хронический панкреатит, инфаркт миокарда, ишемическая болезнь сердца, некоторые болезни печени и почек, гипотиреоз, алкоголизм, подагра.

• до 10 лет 0,34 — 1,24 ммоль/л
• 10 – 15 лет 0,36 – 1,48 ммоль/л
• 15 – 20 лет 0,45 – 1,53 ммоль/л
• 20 – 25 лет 0,41 – 2,27 ммоль/л
• 25 – 30 лет 0,42 – 2,81 ммоль/л
• 30 – 35 лет 0,44 – 3,01 ммоль/л
• 35 – 40 лет 0,45 – 3,62 ммоль/л
• 40 – 45 лет 0,51 – 3,61 ммоль/л
• 45 – 50 лет 0,52 – 3,70 ммоль/л
• 50 – 55 лет 0,59 – 3,61 ммоль/л
• 55 – 60 лет 0,62 – 3,23 ммоль/л
• 60 – 65 лет 0,63 – 3,29 ммоль/л
• 65 – 70 лет 0,62 – 2,94 ммоль/л

Увеличение уровня триглицеридов в крови возможно при остром и хроническом панкреатите, атеросклерозе, ишемической болезни сердца, гипертонии, сахарном диабете, алкоголизме, гепатите, циррозе печени, ожирении, тромбозе сосудов мозга, подагре, хронической почечной недостаточности и др.

АЛАТ – аланинаминотрансфераза. Фермент, необходимый для определения функционального состояния печени. Нормальное содержание в кровинкат/л. Повышенное содержание АЛАТ характерно для инфаркта миокарда, поражения сердечных и соматических мышц.

Сулемовая проба

Принцип реакции состоит в том, что определенная концентрация водного раствора сулемы вызывает помутнение (флокуляцию) сыворотки.

Результат выражается в количестве миллиметров раствора сулемы, потраченных на образование флокуляции. У здоровых людей показатели сулемовой пробы колеблются между 1,8 и 2,5 мл 0,1 %-ного раствора сулемы, по другим исследователям—1,5—2,5 мл раствора сулемы, по нашим данным—1,86±0,05 мл. Показатели ниже 1,5 мл раствора сулемы считаются положительными и указывают на поражение паренхимы печени. Низкие цифры встречаются при инфекционном гепатите: в этих случаях сулемовая проба доходит до 1 мл. По мере выздоровления уровень сулемовой пробы нормализуется.

Некоторые исследователи полагают, что сулемовая проба более чувствительна, чем реакция Таката-Ара. Она может служить для дифференциального диагноза между болезнью Боткина и механической желтухой. При инфекционном гепатите в начале заболевания проба бывает резко положительной, а при благоприятном течении болезни она становится менее интенсивной. В начале заболевания механической желтухой сулемовая проба выпадает в пределах нормальных величин, а в дальнейшем она постепенно становится положительной и развивается параллельно с разрушением печеночной паренхимы в результате закупорки протока.

Показатели сулемовой пробы изменяются и при ревматических заболеваниях. По данным Т. М. Трофимовой (1961), указанная проба положительная в 42% больных ревматизмом и ревматоидным артритом. В. Н. Дзяк и Е. И. Емельяненко (1965) из 43 больных ревматизмом у 16 обнаружили положительные результаты, а у 27 — отрицательные.

Одновременно авторы считают, что результаты этой реакции мало убедительны и часто не совпадали с клиническим течением заболевания. Поэтому эту пробу они считают мало ценной для определения активности ревматического процесса. Наоборот, по мнению Т. М. Трофимовой, отмечается корреляция результатов сулемовой пробы и активности ревматизма. Кроме того, показатели сулемовой пробы наряду с другими тестами позволяют судить о белково-образовательной функции печени при ревматических заболеваниях.

Нами изучено состояние сулемовой пробы у 92 больных ревматоидным полиартритом в процессе лечения. Исследования показали, что у больных ревматоидным полиартритом сулемовая проба оказалась положительная в 2/3 случаев и составляла 1,5±0,04 мл. У больных с минимальной и умеренной степенью активности заболевания указанная проба была незначительно снижена по сравнению со здоровыми. Что касается больных с максимальной степенью, то оказалось, что сулемовая проба до лечения была значительно снижена (1,1 ±0,1 мл). В процессе лечения отмечалась только тенденция к увеличению показателя, но он не приходил к нормальным величинам. Таким образом, можно рекомендовать применение сулемовой пробы для определения активности ревматизма и ревматоидного полиартрита.

Кадмиевая проба—неспецифическая осадочная реакция для диагностики некоторых заболеваний печени, протекающих с увеличением в основном у-глобулинов. Она предложена в 1945 г. Вурман и Вундерли и технически легко выполняется. Кровь на кадмиевую пробу следует брать натощак. Обычно реакция положительна при циррозах печени, раке легкого, инфекционных заболеваниях, эндокардитах, хронических нефритах. М. Д. Михайлов (1964) указывает, что при активной форме ревматизма кадмиевая проба часто может быть положительной. Автором было обследовано 30 больных затяжным септическим эндокардитом и у всех была найдена положительная проба.

Сулемовая проба

Сулемовая проба (реакция Таката — Ара) — это реакция флоккуляции, применяемая при исследовании функции печени. Сулемовая проба основана на способности сывороточного альбумина поддерживать устойчивость коллоидного раствора хлорной ртути и карбоната натрия. При изменении соотношения между белковыми фракциями плазмы крови в сторону глобулинов, которое чаще всего возникает при нарушении функции печени, устойчивость коллоидов нарушается, и из раствора выпадает хлопьевидный осадок.

В норме образования хлопьевидного осадка не происходит. Реакция считается положительной, если осадок наблюдается не менее чем в 3 пробирках.

Сулемовая проба не является строго специфической и бывает положительной как при паренхиматозных поражениях печени, так и при некоторых новообразованиях, ряде инфекционных заболеваний и др.

Сулемовая проба норма

КОАГУЛЯЦИОННЫЕ ПРОБЫ (син.: осадочные пробы, флоккуляционные пробы, диспротеинемические тесты, пробы на лабильность сывороточных белков) — коллоидные реакции, предназначенные для обнаружения количественных и качественных изменений белков сыворотки крови человека при различных патол, состояниях. К К. п. относятся пробы из группы реакций Таката (проба Таката, проба Гросса, реакция Вейхбродта, сулемовая проба), тимоловая проба, кадмиевая проба (син. Вурманна — Вундерли реакция), при к-рой в качестве фактора, нарушающего коллоидную устойчивость сыворотки крови, используют сернокислый кадмий, формоловая проба, цинк-сульфатная проба (реакция Кункеля), кефалин-холестериновая проба, реакция Вельтманна и золотоколлоидальная проба.

К. п. прежде считали только функц, пробами печени, поэтому они в клинике назывались «печеночными пробами». Однако в дальнейшем было установлено, что К. п. имеют диагностическое значение при всех заболеваниях, сопровождающихся диспротеинемией (см. Протеинемия). Результаты К. п. надо расценивать в сочетании с результатами других исследований, как лабораторных, так и клинических. Только в таком случае К. п. имеют значение для диагностики заболеваний печени.

Результаты К. п. выражаются в условных единицах мутности или в количестве миллилитров реактива, добавляемого к сыворотке крови до появления стойкого помутнения.

Использование К. п. в лаб. диагностике сократилось, они заменяются более специфичными, точными и информативными лаб. тестами (электрофорез и Иммуноэлектрофорез белков сыворотки крови, энзимологические тесты и т. п.). Тем не менее благодаря простоте выполнения К. п. все еще применяются достаточно широко. В нашей стране наибольшее распространение полумили тимоловая, сулемовая пробы и проба Вельтманна (см. Вельтманна коагуляционная проба).

Тимоловая проба (проба тимолового помутнения, тимоловая мутность) основана на определении степени помутнения сыворотки крови после добавления насыщенного р-ра тимола в вероналовом буфере. Проба предложена в 1944 г. Маклаганом (N. F. Maclagan). Хим. сущность тимоловой пробы не выяснена; возможно, появление мутности объясняется образованием глобулинотимолофосфолипидного комплекса.

Большинство исследователей считают, что проба является положительной при уменьшении фракции альбуминов и увеличении фракций бета- и гамма-глобулинов и липопротеидов. Интенсивность помутнения зависит от состава буферного р-ра, величины pH, концентрации и степени чистоты тимола и от температуры. Степень помутнения оценивается единицами Маклагана (ед. М), основанными на стандартах, предложенных Кингсберри (F. Kingsburry) в 1926 г. для определения белка в моче. Шанк (R. Shank) и Хогленд (С. Hoagland) в 1946 г. предложили для оценки тимоловой пробы применять бариевосульфатный стандарт, а измерение мутности проводить на спектрофотометре. Результаты, полученные при таком измерении, близки к результатам, получаемым по методу Маклагана.

В качестве унифицированного метода в нашей стране принята модификация У эрга (J. Huerga) и Поппера (Н. Popper) — так наз. тимоловероналовая проба, при к-рой степень мутности определяют фотоколориметрированием при 660 нм против тимоловероналового буфера; расчет ведется по калибровочной кривой.

В норме мутность сыворотки крови после проведения тимоловероналовой пробы равна 0—4 ед. М. Увеличение мутности (положительная проба) свидетельствует о поражении паренхимы печени при эпидемическом или сывороточном гепатите, причем проба положительна еще до развития желтухи, при безжелтушных гепатитах, при циррозах печени, после перенесенного гепатита и т. д.

Сулемовая проба (сулемово-осадочная реакция) относится к группе реакций Таката. Реакция Таката, первоначально называвшаяся реакцией Таката — Ара, была предложена Таката (М. Takata) и Ара (К. Ага) в 1925 г. Эта реакция заключается в том, что при взаимодействии сулемы и карбоната натрия с сывороткой крови в последней появляются хлопья. Механизм реакции полностью не выяснен. Широкое распространение получила модификация реакции Таката, предложенная Гринстедтом (Т. Grinstedt) в 1948 г. и известная как Гринстедта реакция. Именно она и получила название сулемовой или сулемово-осадочной пробы. Сулемовая проба отличается простотой выполнения и хорошей воспроизводимостью. Результаты сулемовой пробы выражаются в миллилитрах 0,1% р-ра сулемы, добавляемого к 0,5 мл не гемолизированной сыворотки крови, разведенной 1 мл физиол, р-ра, до появления стойкого помутнения, когда через вертикальный слой жидкости становится невозможным прочтение газетного текста. Норма равна 1,6—2,2 мл 0,1% р-ра сулемы. Проба положительна при паренхиматозных поражениях печени, особенно при циррозе печени, острых и хрон, токсико-хим. поражениях печени, силикозе, силикотуберкулезе.

Что такое коллоидно-осадочные пробы?

Эти пробы представляют собой разновидность исследования белков плазмы крови. Осадочно-коллоидные пробы основаны на том, что белки разных типов, содержащиеся в плазме крови, с разной скоростью выпадают в осадок при добавлении некоторых реагентов. При этом важен тот факт, что альбумин дольше остается в растворенном состоянии, так как он более устойчив.

Выпадение белков плазмы в осадок приводит к помутнению раствора, степень помутнения определяют с помощью фотометрического метода. Самыми распространенными пробами являются тимоловая, сулемовая и проба Вельтмана. Существуют и другие виды этих проб, но они не используются в современной лабораторной диагностике (проба Таката-Ара, Гросса, Кункеля, кефалин-холестериновая).

Кто назначает проведение коллоидно-осадочных проб, где их можно пройти?

Назначить любую из проб может терапевт, врач общей практики. Часто к ним прибегают врачи-гепатологи для оценки функционального состояния печени. Сдать кровь для проведения анализа можно в биохимической лаборатории.

Когда назначают сулемовую, тимоловую и другие пробы, как к ним подготовиться?

Все пробы оценивают белковый состав плазмы, в большинстве своем их назначают при заболеваниях печени, почек, при длительных инфекционных заболеваниях.

На анализ берут небольшое количество венозной крови – 5–7 мл. Перед сдачей крови и последним приемом пищи должно пройти не менее 8 часов. Сладкие напитки, кофе пить нельзя, разрешается пить простую воду.

Результаты в норме

Нормальный показатель для тимоловой пробы – 0–4 ед. S-H, для сулемовой – 1,6–2,2 мл сулемы (в качестве единицы измерения в этой пробе используют количество сулемы, необходимое для получения помутнения контрольного раствора). Результат пробы Вельтмана – коагуляционная лента (полоса), которая может сужаться и расширяться.

Клиническое значение этих анализов

Проведение коллоидно-осадочных проб используют для выяснения причины желтухи, в диагностике острых и хронических гепатитов, фиброза и цирроза печени, ревматических и инфекционных заболеваний, нефротического синдрома, туберкулеза, опухолевых процессов.

Преимущества и недостатки метода

Актуальность коллоидно-осадочных проб снижается с каждым днем. В настоящее время в больших городах их не делают, только в небольших районных больницах при отсутствии современного оборудования еще можно встретить назначение этих исследований. Связано это, прежде всего, с трудоемкостью и сложностью проведения реакций, требующих дорогостоящих и потенциально ядовитых реактивов.

У этих проб крайне низкая специфичность и точность – они не позволяют проводить качественный и количественный анализ белкового состава плазмы крови. Более точным методом является анализ крови на содержание белковых фракций, а также анализы крови на иммуноглобулины.

Тимоловая проба — что это такое и что показывает

Данный тест имеет несколько наименований: проба Маклагана, тимоловероналовая или тимолового помутнения. Белки разных типов, отвечающие за формирование иммунного ответа, осмотические характеристики крови и прочие показатели, вырабатываются клетками печени и костного мозга. Соотношение альбуминов и глобулинов меняется при повреждении гепатоцитов, как и сама структура белков, теряющих коллоидную устойчивость и выпадающих в осадок.

Тимоловая проба – это осаждение липопротеинов и гамма-глобулинов буферным раствором тимола.

Связываясь с глобулинами различных типов и липопротеинами низкой плотности, реагент вызывает помутнение, степень которого позволяет судить о нарушении протеинового синтеза в гепатоцитах. Результат измеряется в ЕД Маклагана или Shank-Hoaland (сокращенно ед.М и ЕД S-H соответственно).

Тимоловая проба как метод оценки функционального состояния печени была предложена еще в 1944 году. На сегодняшний день используется достаточно редко, в основном по показаниям при развитии симптоматики гепатита А в сочетании с другими тестами. Применяется также в токсикологии и гепатологии для оценки положительной динамики восстановительного процесса в печени после перенесенных заболеваний. Помогает дифференцировать различные типы желтух, так как при болезни Боткина (тип А) почти в 100% случаев дает положительный результат, а при механической – всегда отрицательный.

Норма тимоловой пробы у мужчин

Помутнение раствора при связывании реагента с глобулиновой фракцией может иметь разную выраженность. Конкретное значение в единицах Маклагана или S-Hопределяется при помощи специального прибора электроспектрофотометра. У здорового мужчины показатели должны находиться между 0 и 4. Однако некоторыми лабораториями выставляется верхний предел референсного значения в 5 ед. М.

Норма тимоловой пробы у женщин в крови

Как таковые, половые различия на результат теста никак повлиять не могут. На процесс синтезирования протеинов в печеночных клетках специфические мужские и женские гормоны влияния не оказывают. Поэтому для представительниц прекрасного пола нормальные показатели пробы те же, что и для мужчин: 0-4, максимально 5 единиц помутнения.

Однако применение здоровой молодой женщиной противозачаточных средств (пероральных контрацептивов) способно оказать определенное влияние на протеиновый синтез. Под воздействием препаратов данного типа соотношение белков плазмы меняется, что приводит к некоторому повышению показателей.

Норма тимоловой пробы у детей

Возраст тоже не влияет на соотношение глобулинов различных типов в сыворотке крови. Если функциональных нарушений печени не наблюдается, то глобулины и липопротеины в реакцию с буферным раствором тимола вступать не будут и результат исследования по Маклагану будет отрицательным. Таким образом, тимоловая проба в норме у детей имеет те же показатели, что и у взрослых и не превышает 4 Ед/л.

Однако повышенные результаты могут быть у внешне совершенно здорового ребенка. Если клинические признаки заболевания и субъективные жалобы отсутствуют, а анализ свидетельствует о превышении предельно допустимых значений, необходимо провести комплексное обследование на гепатит А.

Симптомы гепатита А

Причины повышения значений тимоловой пробы

Снижение альбуминовой фракции с одновременным увеличением количества глобулинов в плазме крови свидетельствует, прежде всего, о нарушении работы печени. Такой дисбаланс объясняется тем, что альбумины продуцируются именно гепатоцитами. А вот тканевые макрофаги отвечают за выработку глобулинов. На фоне печеночной дисфункции и диспротеинемии глобулиновая фракция всегда увеличивается.

Патологии печени

Таким образом, положительная тимоловая проба свидетельствует, прежде всего, о следующих патологиях печени:

• Гепатиты вирусного либо инфекционного происхождения. Данный тест позволяет выявить гепатит А еще на стадии репликации вируса, когда другие исследования дают отрицательный результат и клиническая симптоматика отсутствует.
• Цирроз.
• Поражение паренхимы печени алкоголем.
• Токсическое влияние на орган солей тяжелых металлов, токсичных соединений и некоторых лекарственных средств.
• Новообразования, в том числе злокачественные.
• Жировой гепатоз – так называется перерождение гепатоцитов из-за накопленного в них жира.
• Функциональные расстройства, спровоцированные употреблением оральных контрацептивов и прочих препаратов, содержащих гормоны.

Механическая желтуха, при всей совокупности и выраженности клинических симптомов, дает отрицательный результат теста.

Прочие заболевания

Помимо патологий печени, тимоловая проба имеет повышенные значения в случае таких заболеваний, как:

• Аутоиммунные заболевания системного характера (СКВ, ревматоидный полиартрит и прочие).
• Патологии почек, сопровождающиеся альбуминурией (гломеруло- и пиелонефрит, амилоидоз).
• Опухолевые процессы различной локализации, как злокачественные, так и доброкачественные, а также миелома.
• Некоторые заболевания пищеварительной системы (энтериты, сопровождающиеся интенсивной диареей, панкреатит),
• Септический эндокардит (при ревматоидной разновидности тест показывает отрицательный результат).
• Патологические состояния организма, вызванные вирусными инфекциями, малярия.

Случается и так, что тимоловая проба повышена у совершенно здорового человека. Если результат получился положительным на фоне полного отсутствия каких-либо клинических признаков патологии, то налицо несоблюдение диеты. Такие люди, как правило, увлекаются жирным продуктами питания. И уровень холестерина в крови у них всегда повышен.

Тимоловая проба выше нормы у мужчин и женщин в этом случае служит предупреждением. Со временем такое состояние перейдет в патологическую форму и разовьется атеросклеротическое поражение сосудов. Пока ситуация не стала критической, рацион питания нужно пересматривать, уменьшая в нем долю жиров.

Также тимоловая проба повышена у пациентов, принимающих препараты андрогенов, эстрогенов, стероидов, инсулина, эритромицина, тетрациклина, левомицетина.

Показания к назначению анализа

Тимоловая проба обычно назначается в следующих случаях:

• Подозрения на гепатит А – основанием служит характерная симптоматика в виде катаральных явлений, фебрильной температуры, общей интоксикации.
• Вероятность аутоиммунных заболеваний – они сопровождаются продолжительной артралгией, поражением кожи, лихорадкой, повышением СОЭ в анализе крови.
• Комплексное исследование состояния печени – тимоловая проба выполняется наряду с тестами на щелочную фосфатазу, трансаминазы и билирубин.
• Дифференциальная диагностика механической и паренхиматозной желтух. В первом случае результат обычно отрицательный.

С помощью этого анализа также отслеживается результат лечения и процесс восстановления гепатоцитов.

Как подготовиться и сдать анализ

Тимоловая проба делается строго в первой половине дня, для исследования берется венозная кровь. Она помещается в пробирку без добавления антикоагулянта и отправляется в лабораторию. Там в течение часа при помощи 0,1 г плазмы и вероналового буфера и раствора тимола выполняется реакция осаждения. Если результат срочно не нужен, получить его можно на следующий день.

Особой подготовки к взятию пробы крови не требуется. Требования довольно стандартны и заключаются в воздержании от пищи в день сдачи анализа с утра. Последней едой должен быть ужин накануне. Во время еды употреблять жирные продукты нежелательно, так как избыток в крови холестерина влияет на результат теста.